Тесным образом с проблемой введения спермы связан вопрос о разбавлении и хранении спермы. Необходимость разбавления спермы часто диктуется двумя соображениями.
Рис. 37. Впрыскивание спермы курице (по Никитиной).
1. Получение спермы у самцов обычно сопряжено со значительной затратой сил и времени, почему возникает настойчивая потребность полученную сперму использовать для осеменения максимально возможного количества самок. Это сокращает затрату труда и времени на осеменение одной самки и позволяет вести работу в более широком масштабе, что для многих задач гибридизации чрезвычайно важно.
2. Во многих случаях сперма получается в столь ничтожном количестве, что с ней технически трудно манипулировать. Так, птицы дают вообще эякулят, не превышающий 0,5–1,0 см 3. При добывании спермы хирургическим путем из эпидидимиса количество спермы (масса сперматозоидов) может быть еще меньше. Наконец при гибридизации с редкими видами в распоряжении гибридизатора может находиться всего один самец, каждым эякулятом которого приходится крайне дорожить.
Проблема разбавления спермы в настоящее время в значительной степени разрешена, в особенности работами Милованова и др., и быстро совершенствуется. Выяснено в первую очередь для млекопитающих, что изотонические растворы фосфатов, сульфатов и тартратов в смеси с изотоническим раствором глюкозы являются средой, при помощи которой можно во много раз разбавить сперму либо вовсе без вреда для ее оплодотворяющей способности либо лишь со слабым ее понижением.
Так как у каждого вида свое осмотическое давление спермы, которое иногда довольно заметно отличается от других видов, то для получения наилучших результатов для каждого вида должен быть подобран специфический разбавитель.
Приводимая таблица показывает состав разбавителей для домашних млекопитающих.
I. Глюкозо-фосфатные (в двух растворах)
Для барана (ГФО-2)
1. Глюкоза безводная — 64,0
— Вода дестилированная — 1000,0
2. Натрий фосфорнокислый однозамещ. — 41,0
— Калий фосфорнокислый однозамещ. — 1,7
— Кальций фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Магний фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Вода дестилированная — 1 000,0
Для быка (ГФК-3)
1. Глюкоза безводная — 57,0
— Вода дестилированная — 1000,0
2. Натрий фосфорнокислый двузамещ. — 36,7
— Калий фосфорнокислый однозамещ. — 1,4
— Натрий сернокислый безводный — 1,7
— Кальций фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Магний фосфорнокислый двузамещ. — 0,1
— Вода дестилированная — 100,0
II. Глюкозо-сульфатные (в одном растворе)
Для жеребца (СГЛ-2)
Глюкоза безводная — 57,6
Натрий сернокислый безводный — 3,4
Пептон (без солей) — 2,0
Вода дестилированная — 1000,0
Для быка (СГК- 2)
Глюкоза безводная — 12,0
Натрий сернокислый безводный — 13,6
Пептон (без солей) — 5,0
Вода дестилированная — 1000,0
Оба раствора хранятся отдельно и перед употреблением смешиваются в отношении 1:1.
Для птиц разбавителем могут быть жидкие фракции яичного белка, отсасываемые пипеткой[29].